Dokument: Die intrazelluläre Domäne von Drosophila - Crumbs: Identifizierung von Interaktionspartnern und Analyse posttranslationaler Modifikation
| Titel: | Die intrazelluläre Domäne von Drosophila - Crumbs: Identifizierung von Interaktionspartnern und Analyse posttranslationaler Modifikation | |||||||
| URL für Lesezeichen: | https://docserv.uni-duesseldorf.de/servlets/DocumentServlet?id=3423 | |||||||
| URN (NBN): | urn:nbn:de:hbz:061-20070504-091849-6 | |||||||
| Kollektion: | Dissertationen | |||||||
| Sprache: | Deutsch | |||||||
| Dokumententyp: | Wissenschaftliche Abschlussarbeiten » Dissertation | |||||||
| Medientyp: | Text | |||||||
| Autor: | Özüyaman, Susann [Autor] | |||||||
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| Beitragende: | Prof. Dr. Knust, Elisabeth [Gutachter] Prof. Dr. Ernst, Joachim F. [Gutachter] | |||||||
| Stichwörter: | , Crumbs | |||||||
| Dewey Dezimal-Klassifikation: | 500 Naturwissenschaften und Mathematik » 570 Biowissenschaften; Biologie | |||||||
| Beschreibung: | Der Crumbs(Crb)-Komplex spielt eine wichtige Rolle bei der Aufrechterhaltung der Zellpolarität und des Gewebeverbandes von Epithelien in Drosophila und Säugern. Der genaue Mechanismus und die Funktion der einzelnen Proteine sind noch nicht vollständig aufgeklärt. Bei den bekannten Proteinen des Crb-Komplexes wie Stardust, DPatj und DLin-7 handelt es sich um Gerüstproteine. Effektoren wie Proteine von Signaltransduktionskaskaden als Komponenten des Crb-Komplexes sind bisher nicht bekannt. Aus diesem Grund wurde in dieser Arbeit versucht, neue Bindungspartner des Crb-Komplexes zu identifizieren. Dazu wurde mittels affinitätschromatographischer Methoden der Crb-Komplex aufgereinigt und potentielle Bindungspartner mittels Massenspektrometrie identifiziert und Bindungspartner des C-Terminus der intrazellulären Domäne von Crb anhand des homology modellings ermittelt. Mittels Massenspektrometrie konnten putative Bindungspartner der intrazellulären Domäne identifiziert werden. Die mögliche Interaktion mit dem Crb-Komplex konnte durch weiterführende Studien für einige Kandidaten bestätigt werden (Volkmar, 2005). Die Verifizierung der Bindung der durch homology modelling ermittelten Kandidaten an das ERLI-Motiv der intrazellulären Domäne mit Hilfe des Hefe-2-Hybridsystems konnte drei der Proteine als putative Bindungspartner bestätigen.
Bei der massenspektrometrischen Analyse des Köder-Proteins FLAG-Crb-intra konnte eine Phosphorylierung der intrazellulären Domäne an einer von fünf putativen Aminosäuren (einem Threonin, zwei Serinen oder zwei Tyrosinen) festgestellt werden. Die Überexpression von Varianten der Transgen-kodierten Crb Proteine, zeigten eine funktionelle Bedeutung des Threonins an Position 6, des Tyrosins an Position 10, der Glutaminsäure an Position 16 und des ERLI-Motivs der intrazellulären Domäne von Crb im Drosophila Embryo. In Drosophila sind bei Expression der Varianten der Transgen-kodierten Crb Proteine dominante Phänotypen im adulten Flügel und in den Imaginalscheiben zu beobachten. Diese Phänotypen sind abhängig vom ERLI-Motiv, dem Tyrosin an Position 10 und der Glutaminsäure an Position 16 der intrazellulären Domäne von Crb. Innerhalb der intrazellulären Domäne von Crb sind oben genanntes Tyrosin, die Glutaminsäure und das ERLI-Motiv wichtig für die Funktion im Drosophila Embryo und im Flügel, wohingegen das Threonin nur im Drosophila Embryo eine Rolle zu spielen scheint. | |||||||
| Lizenz: |  Urheberrechtsschutz | |||||||
| Fachbereich / Einrichtung: | Mathematisch- Naturwissenschaftliche Fakultät » WE Biologie | |||||||
| Dokument erstellt am: | 16.06.2006 | |||||||
| Dateien geändert am: | 04.05.2007 | |||||||
| Promotionsantrag am: | 09.05.2006 | |||||||
| Datum der Promotion: | 09.05.2006 |
