Humane Hyaluronidasen als Wirkstofftargets : rekombinante Expression, Aktivitätsbestimmung und Testung von Substanzen
In dieser Arbeit wurde die Aktivität der hPH-20 und hHyal-1 als Teil eines Autodisplay-Fusionsproteins untersucht. Es wurden Außenmembran-Vesikel (AMV) aus E. coli JC8031 zur Enzymmessung eingesetzt. Sie wurden in ihren Eigenschaften charakterisiert. Anschließend wurden die AMV zur Enzymmessung eing...
Verfasser: | |
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Weitere Beteiligte: | |
FB/Einrichtung: | FB 12: Chemie und Pharmazie |
Dokumenttypen: | Dissertation/Habilitation |
Medientypen: | Text |
Erscheinungsdatum: | 2015 |
Publikation in MIAMI: | 17.04.2015 |
Datum der letzten Änderung: | 10.02.2021 |
Angaben zur Ausgabe: | [Electronic ed.] |
Schlagwörter: | Hyaluronsäure; Hyaluronidasen; Autodisplay; Inhibitortestung; rekombinante Expression |
Fachgebiet (DDC): | 540: Chemie
610: Medizin und Gesundheit |
Lizenz: | InC 1.0 |
Sprache: | Deutsch |
Format: | PDF-Dokument |
URN: | urn:nbn:de:hbz:6-19299344250 |
Permalink: | https://nbn-resolving.de/urn:nbn:de:hbz:6-19299344250 |
Onlinezugriff: | diss_orlando_zoya.pdf |
In dieser Arbeit wurde die Aktivität der hPH-20 und hHyal-1 als Teil eines Autodisplay-Fusionsproteins untersucht. Es wurden Außenmembran-Vesikel (AMV) aus E. coli JC8031 zur Enzymmessung eingesetzt. Sie wurden in ihren Eigenschaften charakterisiert. Anschließend wurden die AMV zur Enzymmessung eingesetzt und es ergab sich im photometrischen Testverfahren eine katalytische Aktivität von 582 mU/mL. Im Weiteren wurde eine kapillarelektrophoretische Methode zur Analytik der Hyaluronidase-Aktivität etabliert. Im Anschluss wurden Testsubstanzen auf Hemmung der hPH-20 hin geprüft. Im zweiten Teil der Arbeit wurde die Enzymaktivität der hHyal-1 als Autotransporter-Fusionsprotein untersucht. Die hHyal-1 tragenden E. coli Zellen zeigten eine gut nachweisbare Aktivität von 76,56 U/mL (OD578 von 10) und wurden zur Identifizierung von Hemmstoffen eingesetzt. Es wurden drei Saponin-Derivate, Gypsophila Saponin 2, SA1657 und SA1641, als neue Hemmstoffe der hHyal-1 identifiziert.